炎癥因子、炎癥介質(zhì)抑制實(shí)驗(yàn) 紫外線、生物和化學(xué)因素均可誘導(dǎo)產(chǎn)生炎癥因子或炎癥介質(zhì)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)、脂質(zhì)與糖類發(fā)生非酶糖基化反應(yīng)，生成脂褐素等無法代謝的產(chǎn)物，同時(shí)可刺激黑色素細(xì)胞產(chǎn)生黑色素，引起色素的沉積，存留于皮膚中，引發(fā)老年斑?？赏ㄟ^酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、蛋白質(zhì)免疫印跡等方法測試產(chǎn)品對炎癥因子、炎癥介質(zhì)的抑制效果，評價(jià)其延緩皮膚衰老功效。

       基質(zhì)金屬蛋白酶-1活性（MMP-1）抑制實(shí)驗(yàn) MMP-1又稱膠原酶-1，是導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)皺縮、細(xì)紋等衰老癥狀的最主要的酶。采用分光光度法檢測產(chǎn)品對基質(zhì)金屬蛋白酶活性的抑制情況，可以評價(jià)其抗衰老功效。

       細(xì)胞表達(dá)膠原蛋白實(shí)驗(yàn) 皮膚中膠原蛋白的流失，會(huì)造成皮膚松弛、彈性下降、細(xì)紋增多且不斷加深，呈現(xiàn)衰老跡象。人體皮膚中的膠原蛋白主要為Ⅰ型和Ⅲ型。其中，Ⅰ型膠原蛋白約占70%，Ⅲ型膠原蛋白占30%。皮膚出現(xiàn)老化時(shí)，膠原蛋白含量逐漸降低，兩者比例發(fā)生倒置，同時(shí)膠原變粗，出現(xiàn)異常交聯(lián)。可采用免疫細(xì)胞化學(xué)法等方法，對引起Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白及其他相關(guān)蛋白、基因、酶改變的標(biāo)記物進(jìn)行測試，評價(jià)產(chǎn)品抗衰老功效。

       線粒體膜電位實(shí)驗(yàn) 線粒體膜電位的變化與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。通過測試線粒體膜電位的提升情況，可以評價(jià)皮膚的衰老狀況，間接評價(jià)產(chǎn)品的抗衰老功效。

       細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn) 皮膚的細(xì)胞凋亡是正常的生理現(xiàn)象，隨著年齡的增長，真皮中的成纖維細(xì)胞會(huì)逐漸凋亡。此外，UVA照射會(huì)引起細(xì)胞損傷，造成皮膚光老化。通過紫外光照射體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)加入抗氧化物質(zhì)，用顯微鏡觀察細(xì)胞是否出現(xiàn)解體、排列紊亂、脫顆粒等現(xiàn)象，可分析細(xì)胞的凋亡率。此外，還可結(jié)合抗炎測試，綜合評價(jià)抗氧化物質(zhì)對抑制細(xì)胞凋亡的作用，反映產(chǎn)品的抗衰老功效。

        皮膚緊致測試 彈性纖維被破壞、皮膚彈性減弱，會(huì)導(dǎo)致皮膚緊致度下降，出現(xiàn)皮膚下垂。因此，可根據(jù)皮膚彈性和下垂度變化評價(jià)產(chǎn)品的緊致功效。皮膚下垂度主要通過對面部正面和仰臥位的主觀評估判斷。

        皮膚彈性測試 皮膚彈性是衡量皮膚衰老程度的重要指標(biāo)。皮膚彈性主要由皮膚膠原纖維、彈力纖維的數(shù)量和排列關(guān)系決定。隨著年齡的增加，皮膚中可溶性膠原纖維減少，不溶性膠原纖維增加，皮膚的伸展度隨之減少，皮膚彈性降低。使用特定儀器測試皮膚彈性，可以評價(jià)產(chǎn)品延緩衰老的功效。

       皮膚水分含量測試 真皮層水分含量流失，會(huì)導(dǎo)致角質(zhì)層因?yàn)槿彼a(chǎn)生細(xì)紋。健康皮膚角質(zhì)層的含水量為10%~30%，角質(zhì)層含水量低于10%時(shí)，皮膚就會(huì)變得干燥、粗糙，容易產(chǎn)生細(xì)紋。測試使用產(chǎn)品前后皮膚水分含量的變化，可間接評價(jià)產(chǎn)品抗衰老功效。現(xiàn)在常用的測試皮膚水分含量的儀器有共聚焦拉曼光譜儀等。

       皮膚顏色測試 皮膚老化后，膚色會(huì)泛黃發(fā)暗，出現(xiàn)老年斑。紫外線的照射會(huì)促使黑色素細(xì)胞分泌黑色素，在自由基和炎癥反應(yīng)的作用下產(chǎn)生曬斑，呈現(xiàn)色素沉著。同時(shí)，還原性糖與蛋白質(zhì)的結(jié)合物高級糖基化終末產(chǎn)物（AGEs），為棕色或黑色的大分子物質(zhì)，出現(xiàn)在真皮和表皮。隨著年齡的增長，人體皮膚會(huì)出現(xiàn)AGEs沉積，導(dǎo)致皮膚發(fā)黃，產(chǎn)生褐斑、老年斑。因此，評估皮膚顏色的變化，可以間接評價(jià)產(chǎn)品的抗衰老功效。

       皮膚微循環(huán)測試 皮膚微循環(huán)系統(tǒng)是個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)，也是皮膚的重要結(jié)構(gòu)。作為皮膚屏障的重要組成部分，皮膚微循環(huán)系統(tǒng)起著儲存血液和營養(yǎng)皮膚的重要作用。皮膚血流量是評價(jià)皮膚微循環(huán)情況的重要標(biāo)準(zhǔn)。研究表明，年輕人皮膚血管排列整齊，年齡較大者血管擴(kuò)張、扭曲、排列不規(guī)則?？傮w上，隨著年齡的增長，皮膚血流量增加，但由于皮膚微循環(huán)還受其他因素影響，所以在評價(jià)化妝品原料或產(chǎn)品的抗衰老功效時(shí)，一般只作為輔助指標(biāo)。常用的測試儀器為激光多普勒成像儀。該儀器利用激光多普勒原理，檢測人體組織微循環(huán)。

（文章來源：中國醫(yī)藥報(bào)2020-11-05期報(bào)刊）